巨細胞病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫捕獲法）說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：巨細胞病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫捕獲法）
【包裝規格】 
48人份／盒，96人份／盒。
【預期用途】
該產(chǎn)品用于定性檢測人血清或血漿中的巨細胞病毒IgM抗體。 
巨細胞病毒（CMV）屬皰疹病毒β亞科，其主要感染途徑是直接或間接接觸，包括接觸被感染病人的唾液、生殖器分泌物、尿液和乳汁，同時(shí)也可通過(guò)胎盤(pán)傳播或發(fā)生醫源性傳染。病毒感染后，血清中CMV IgM抗體持續4～6個(gè)月均可測出，個(gè)別情況可持續數年，血清中CMV IgG抗體相對恒定地終身存在。CMV IgM抗體檢出可用于急性CMV感染的診斷，但不能區分原發(fā)性感染和繼發(fā)性感染。CMV IgG抗體檢出可用于診斷有無(wú)CMV感染，并對易感人群采取適當的措施。CMV抗體的檢測對免疫受損患者、孕婦、器官移植的供受雙方及獻血者有重要意義。
【檢驗原理】
酶聯(lián)免疫捕獲法原理：用抗人IgM-μ鏈單克隆抗體包被微孔板，加待檢血清或血漿到板孔中，樣品中所含的IgM抗體與微孔板上的抗人IgM-μ鏈抗體結合，形成抗體－二抗復合物。洗板后加入巨細胞病毒抗原酶標記物，形成（抗體－二抗－抗原酶標記物）免疫復合物，洗板后加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應，通過(guò)酶標儀測定顯色反應的強弱即可定性檢測待檢樣品中的巨細胞病毒IgM抗體。
【主要組成成分】
1. 本試劑盒包含的組分
序號 組分名稱(chēng) 主要成分 使用方法 裝量
    96人份／盒 48人份／盒
1 預包被抗人IgM-μ鏈抗體的微孔板 微孔板中預包被小鼠抗人IgM-μ鏈單克隆抗體。 可拆成單孔，直接使用 96孔 48孔
2 巨細胞病毒抗原酶標記物 辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的巨細胞病毒重組抗原；硼酸鹽緩沖液，含防腐劑、蛋白穩定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 巨細胞病毒IgM抗體陽(yáng)性對照 巨細胞病毒IgM抗體陽(yáng)性人血漿或血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 巨細胞病毒IgM抗體陰性對照 巨細胞病毒IgM抗體陰性人血漿或血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 巨細胞病毒IgM抗體臨界對照 巨細胞病毒IgM抗體陽(yáng)性人血漿或血清；硼酸緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 顯色液A 檸檬酸、過(guò)氧化氫。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 顯色液B 檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 濃縮洗滌液（10倍） 磷酸鹽緩沖液，含0.5%Tween-20，10倍濃縮。 用蒸餾水或去離子水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 樣品稀釋液（IgM） 硼酸鹽緩沖液，含甘油。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 終止液 0.5 mol/L H2SO4溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋   1個(gè) 1個(gè)
12 封板膜   4片 4片
13 記錄紙   1份 1份
注：酶標記物、陽(yáng)性對照、陰性對照、臨界對照，必須使用試劑盒配備的，不能使用其它批號產(chǎn)品。樣品稀釋液（IgM）可用于本公司所有IgM抗體檢測系列的ELISA試劑盒。顯色液A、顯色液B、終止液、濃縮洗滌液為通用試劑，可用于本公司所有ELISA試劑盒。
2. 需要但未提供的材料：
蒸餾水或去離子水
微孔板清洗器
10μL～100μL、1mL移液器與一次性吸嘴
37℃恒溫設備
微孔振蕩器
酶標儀
60分鐘或更長(cháng)時(shí)程的計時(shí)器
【儲存條件及有效期】
2℃～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。
拆封后未用完的微孔板應放入密封袋內2℃～8℃保存。各組分拆封后應在一個(gè)月內用完。
生產(chǎn)日期、失效日期：詳見(jiàn)標簽。
【適用儀器】
具有450nm、630nm波長(cháng)的酶標儀
【樣本要求】
應按照臨床采血技術(shù)規范操作采集血清或血漿樣品。室溫保存樣品不要超過(guò)8小時(shí)；若實(shí)驗在8小時(shí)以后進(jìn)行，需將樣品保存在2℃～8℃；如保存超過(guò)1周則保存在-20℃以下，并避免反復凍融。本試驗可用于含EDTA、檸檬酸鈉、肝素鈉、草酸鈉、雙草酸鹽抗凝劑樣本的檢測，但含其它種類(lèi)抗凝劑的樣本能否用于本試驗尚無(wú)實(shí)驗數據。盡管膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯對本試劑盒檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，仍應避免使用黃疸、溶血或高血脂樣品。明顯被污染的樣品不能用于檢測。
【檢驗方法】
1. 試驗過(guò)程注意事項
1.1 試劑盒各組分從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應在室溫（20℃～25℃）平衡至無(wú)潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應放入密封袋內保存。
1.2 在儲存及溫育過(guò)程中，應避免強光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3 為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應使用一次性吸嘴，不要重復使用。
1.4 在取用對照品和酶標記物之前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過(guò)的樣品。
1.5 嚴格遵守規定的溫育時(shí)間和溫度。如果第一個(gè)孔與最后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔太長(cháng)，將會(huì )導致不同的“預溫育”時(shí)間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。
1.6 洗滌結束時(shí)，應將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，以確保所有孔內均無(wú)洗滌緩沖液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動(dòng)洗板機，應注意正確操作。
2. 試驗準備
2.1 試劑盒反應試劑準備
2.1.1 微孔條
將檢測所需數量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2 洗滌液
在干凈的量筒內稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3 其它液體組分
直接使用，使用前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻。
2.2 樣品準備
樣品1:100稀釋?zhuān)喝?0L待檢樣品，加入至含有1mL樣品稀釋液（IgM）的小試管內，充分混勻。
3. 檢測過(guò)程
3.1 每次實(shí)驗每板須設空白孔（若以雙波長(cháng)檢測不設空白孔）、陽(yáng)性對照、陰性對照各1孔，臨界對照3孔?？瞻卓撞患訕悠泛兔笜擞浳?，只加洗液、顯色液A、顯色液B和終止液；陽(yáng)性對照、陰性對照、臨界對照直接使用，100μL/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100μL。置37℃±1℃溫育60分鐘。
3.2 甩凈孔中液體，將洗液注滿(mǎn)每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復3次。除空白孔外每孔加酶標記物50μL，置37℃±1℃溫育60分鐘。
3.3 甩凈孔中液體，同上洗板3次，拍干后各孔加顯色液A、顯色液B各50μL，置37℃±1℃避光10～15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4 單波長(cháng)檢測：以空白孔調零，用酶標儀讀取450nm處的A值；
雙波長(cháng)檢測：用酶標儀讀取450nm和630nm處的A值，以A450nm－A630nm計算A值。
4. 參考范圍
陰性對照A值≤0.15；0.20≤臨界對照A值平均值≤0.80，臨界對照A值平均值／陰性對照A值平均值≥2.0；陽(yáng)性對照A值＞臨界對照A值平均值，證明實(shí)驗成立。否則試驗結果無(wú)效，需重新試驗。
【陽(yáng)性判斷值】
計算S/CO值，S/CO=樣品A值／臨界對照A值平均值。
反應性（R）：S/CO≥1.1
可疑（S）：0.9＜S/CO＜1.1
陰性（N）：S/CO≤0.9
【檢驗結果的解釋】
1. 結果為反應性提示巨細胞病毒急性或近期感染，對反應性和可疑結果建議1～2周后再次采樣檢測，同時(shí)進(jìn)行CMV-IgG抗體檢測，動(dòng)態(tài)觀(guān)察抗體水平的變化。
2. 檢測結果僅供臨床參考，臨床醫生應結合病史、癥狀及其它檢測結果做出診斷。
【檢驗方法的局限性】
1. 樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染可能導致錯誤結果。
2. 未發(fā)現本品與抗核抗體陽(yáng)性血清、類(lèi)風(fēng)濕因子陽(yáng)性血清、慢性乙型肝炎病人血清及交叉反應項目中所列病原體的IgM抗體陽(yáng)性血清有交叉反應，但與其它病原體的交叉反應尚無(wú)實(shí)驗數據。
【產(chǎn)品性能指標】
1. 靈敏度、特異性
本品檢測1016例不同人群樣本，靈敏度為99.9%，特異度為99.8%。
2. 精密性
批內變異系數CV（%）不高于15%（n＝10）。
3. 交叉反應
未發(fā)現本品與抗核抗體陽(yáng)性血清、類(lèi)風(fēng)濕因子陽(yáng)性血清、慢性乙型肝炎病人血清及以下病原體的IgM抗體陽(yáng)性血清有交叉反應：弓形蟲(chóng)、麻疹病毒、風(fēng)疹病毒、單純皰疹病毒Ⅰ、Ⅱ型。
4. 干擾試驗
4.1 與樣品接觸的抗凝劑（EDTA、檸檬酸鈉、肝素鈉、草酸鈉、雙草酸鹽）對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾。
4.2 內源性物質(zhì)膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾。
4.3 纖維蛋白原對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，因此本品可以檢測人血清或血漿樣品。
【注意事項】
1. 本品僅用于體外診斷，一次性使用。
2. 用于制備本品陰性對照、陽(yáng)性對照、臨界對照的血清或血漿已經(jīng)HBsAg、HCV抗體、梅毒螺旋體抗體和HIV抗體檢測為陰性，試劑盒內其它各種組分均無(wú)生物傳染性。由于不能保證檢測各組分所有的傳染性因素，因此本品應作為具有潛在的傳染性材料對待，所有接觸試劑盒的人員應按實(shí)驗室規范要求進(jìn)行操作。
3. 任何臨床樣品都應作為具有傳染性樣品對待。
4. 待檢樣品及其他潛在感染材料試驗后應予以消毒。
5. 注意避免皮膚或黏膜直接接觸試劑或樣品。顯色液中含TMB，終止液含硫酸。含TMB的試劑在試驗中會(huì )誘發(fā)其它反應；含硫酸的試劑有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應立即用水徹底清洗。
【標識的解釋】
包裝標簽
的標識    
標識的含義 溫度限制 體外診斷醫療器械 參考使用說(shuō)明 不得二次使用

【參考文獻】
[1] Griffiths PD. Molecular biology and immunology of cytomegalovirus. Biochem J, 1978, 241:313.
[2] 中華兒科學(xué)會(huì )感染消化學(xué)組, 中華兒科雜志編委會(huì ). 全國小兒巨細胞病毒感染學(xué)術(shù)會(huì )議紀要. 中華兒科雜志, 1995, 33(1):7.
[3] 徐桂林, 陳嘉華, 張蘇, 等. 199例產(chǎn)婦及新生兒巨細胞病毒感染的分析. 中華婦產(chǎn)科雜志, 1989, 24(3):130.
[4] Surresh B. Boppana, Robert F. Pass, Willian J. Britt. Virus-specific antibody responses in mothers and their infants cytomegalovirus infection. The Journal Infection Diseases, 1993,167(1):72.
[5] Stagno S. In: Remington JS, Klein JO editor. Infectous diseases of the fetus and new born infant[J]. Philadelphia :WB saunder CO., 1995, 312-353.
【基本信息】
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【醫療器械注冊證書(shū)編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】國械注準20173400137
【說(shuō)明書(shū)核準及修改日期】2017年1月23日