弓形蟲(chóng)IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：弓形蟲(chóng)IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規格】
48人份／盒、96人份／盒。
【預期用途】
定性檢測人血清或血漿樣本中的弓形蟲(chóng)IgM抗體。
用于弓形蟲(chóng)病的早期輔助診斷。檢測不得用于無(wú)癥狀人群的產(chǎn)前篩查；不得將本試劑的檢測結果單獨作為終止妊娠的依據。
弓形蟲(chóng)?。╰oxoplasmosis）是由剛地弓形蟲(chóng)所引起的人畜共患病。這種疾病是通過(guò)感染食物來(lái)傳播的，或由卵囊感染，或直接由家畜感染以及宮內感染。弓形蟲(chóng)感染后，特異性IgM抗體可在感染后6天左右檢出，然后維持數周至數月，最后逐漸下降直至消失；弓形蟲(chóng)IgG抗體的出現晚于IgM抗體，感染后2～3個(gè)月才達峰值，維持時(shí)間也較長(cháng)。弓形蟲(chóng)IgM抗體檢測可用于近期弓形蟲(chóng)感染的診斷；弓形蟲(chóng)IgG抗體檢測可用于弓形蟲(chóng)既往感染的診斷，也可用于近期感染的輔助診斷。在首次檢出弓形蟲(chóng)IgG抗體后，2～3周后再次采樣檢測，如IgG抗體效價(jià)有4倍以上的增長(cháng)，則提示近期感染。
【檢驗原理】
本品應用酶聯(lián)免疫法（ELISA）間接法原理檢測人血清或血漿樣本中的弓形蟲(chóng)IgM抗體。樣本中待測抗體與微孔板表面的弓形蟲(chóng)抗原形成抗原抗體復合物，加入抗人IgM抗體酶標記物，形成（抗原－待測抗體－抗人IgM抗體酶標記物）免疫復合物，加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應，通過(guò)酶標儀測定顯色反應即可定性檢測待測樣品中的弓形蟲(chóng)IgM抗體。
【主要組成成分】
1. 本試劑盒中包含的組分：
序號 組分名稱(chēng) 主要成分 使用方法 裝量
    96人份/盒 48人份/盒
1 預包被弓形蟲(chóng)抗原的微孔板 微孔板中預包被弓形蟲(chóng)天然抗原 可拆成單孔，直接使用 96孔 48孔
2 抗人IgM抗體酶標記物 辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的抗人IgM抗體；硼酸鹽緩沖液，含0.002%苯酚紅、蛋白穩定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 弓形蟲(chóng)IgM抗體陽(yáng)性對照 弓形蟲(chóng)IgM陽(yáng)性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 弓形蟲(chóng)IgM抗體陰性對照 弓形蟲(chóng)IgM陰性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
5 顯色液A 含檸檬酸、過(guò)氧化氫 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
6 顯色液B 含檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB） 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 濃縮洗滌液
（10倍） 磷酸鹽緩沖液，含吐溫-20，10倍濃縮 用蒸餾水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
8 樣品稀釋液
（IgM） 磷酸鹽緩沖液，含甘油，山羊抗人IgG抗體。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
9 終止液 硫酸溶液 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
10 密封袋   1個(gè) 1個(gè)
11 封板膜   1片 1片
12 記錄紙   1份 1份

2. 需要但未提供的材料：
蒸餾水或去離子水
微孔板清洗器
10μL～100μL、1mL移液器與一次性吸嘴
37℃恒溫設備
微孔振蕩器
酶標儀
60分鐘或更長(cháng)時(shí)程的計時(shí)器
【儲存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。
生產(chǎn)日期及失效日期見(jiàn)標簽。
【適用儀器】
具有450nm和630nm波長(cháng)的酶標儀
【樣本要求】
本試驗用血清或血漿進(jìn)行檢測，用量為10μL。按照標準方法收集血清或血漿，室溫保存樣品不要超過(guò)8小時(shí)，若實(shí)驗在8小時(shí)以后進(jìn)行，需將樣品保存在2℃～8℃，如保存超過(guò)1周則保存在-20℃以下。本試驗可用于含乙二胺四乙酸（EDTA）、檸檬酸鈉、肝素鈉、草酸鈉抗凝劑樣本的檢測，但含其它種類(lèi)抗凝劑的樣本能否用于本試驗尚無(wú)實(shí)驗數據。
【檢驗方法】
1. 試驗過(guò)程注意事項
1.1 試劑盒各組分從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應在室溫（20℃～25℃）平衡至無(wú)潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應放入密封袋內保存。
1.2 在儲存及溫育過(guò)程中，應避免強光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3 為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應使用一次性吸嘴，不要重復使用。
1.4 在取用對照品和酶標記物之前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過(guò)的樣品。
1.5 嚴格遵守規定的溫育時(shí)間和溫度。如果第一孔與最后一孔加樣時(shí)間間隔太長(cháng)，將會(huì )導致不同的“預溫育”時(shí)間，從而影響測量值的準確性及重復性。
1.6 洗滌結束時(shí)，應將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，確保所有孔內均無(wú)殘留洗滌液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動(dòng)洗板機，應注意正確操作。
2. 試驗準備
2.1 試劑盒反應試劑準備
2.1.1 微孔條
將檢測所需數量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2 洗滌液
在干凈的量筒內稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3 其它液體組分
直接使用，使用前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻。
2.2 樣品準備
樣品1:100稀釋?zhuān)喝?0μL待檢樣品，加入至含有1mL樣品稀釋液（IgM）的小試管內，充分混勻。
3. 檢測過(guò)程
3.1 每次實(shí)驗每板須設空白孔（若以雙波長(cháng)檢測不設空白孔）、陽(yáng)性對照各1孔，陰性對照3孔?？瞻卓撞患訕悠泛兔笜擞浳?，只加洗液、顯色液A、B和終止液；陽(yáng)性對照、陰性對照直接使用，100μL/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100μL。置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.2 甩凈孔中液體，將洗液注滿(mǎn)每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復3次。除空白孔外每孔加酶標記物50μL，置37℃±1℃溫育30分鐘。
3.3 甩凈孔中液體，同上洗板3次，甩凈拍干后，各孔加50μL顯色液A、50μL顯色液B，置37℃±1℃避光15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4以空白孔調零，用酶標儀讀取450nm處的A值。
4. 質(zhì)量控制
以空白孔調零，450nm波長(cháng)測定A值。陽(yáng)性對照值A平均值≥0.25，陰性對照A平均值≤0.20，證明實(shí)驗成立。
【陽(yáng)性判斷值】
如陰性對照＜0.07，按0.07計算；
計算S/N值，S/N值＝樣品A值÷陰性對照A值平均值
S/N值≥3.0，則判為陽(yáng)性。
S/N值＜2.43，判為陰性。
如2.43≤S/N值＜3.0，即A值在0.17～0.21之間為可疑結果（陰性對照＜0.07時(shí)），需復試。
【檢驗結果的解釋】
本品可定性檢測抗弓形蟲(chóng)IgM抗體，本實(shí)驗陽(yáng)性提示弓形蟲(chóng)急性或近期感染，結果僅供臨床參考。對陽(yáng)性和可疑結果建議1～2周后再次采樣檢測，動(dòng)態(tài)觀(guān)察抗體水平的變化。對復試或復測陽(yáng)性結果建議做阻斷試驗或用其它方法確認。
【檢驗方法的局限性】
1.  樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染、高溫失活都可能導致錯誤結果。
2.  不能僅依據單次的實(shí)驗結果做出診斷。精確的診斷應考慮臨床病史、癥狀及血清學(xué)實(shí)驗，并且血清學(xué)實(shí)驗結果對于免疫低下患者的診斷價(jià)值有限。
【產(chǎn)品性能指標】
1.  特異性、靈敏度
本品檢測1327例不同人群樣本，靈敏度為100%，特異度為99.9％。
2.  重復性
用精密性參考品測定，變異系數（CV）不高于15%（n＝10）。
【注意事項】
1.  本品僅用于體外診斷，不同批號試劑組分不得混用。
2.  嚴格按說(shuō)明書(shū)操作，操作前必須先將試劑盒平衡至室溫，操作時(shí)反應溫度和時(shí)間必須嚴格控制。
3.  拆封后未用完的包被板應放入密封袋內保存。
4.  凡是染菌、嚴重溶血、黃疸或高血脂的待檢血清可能引起錯誤結果，應重新采樣復試。
5.  本實(shí)驗陽(yáng)性提示弓形蟲(chóng)急性或近期感染。臨床醫生應結合病史、體驗等全面考慮診斷。判斷臨床意義應動(dòng)態(tài)觀(guān)察，即對陽(yáng)性和可疑者要求1～2周后進(jìn)行復查，觀(guān)察抗體水平的變化。
6.  對檢測或復測陽(yáng)性結果建議做阻斷試驗或用其它方法確認。
7.  本試劑盒在制備過(guò)程中用作原料（陰性、陽(yáng)性）的血清或血漿已經(jīng)乙肝表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒（HCV）抗體、梅毒螺旋體抗體和人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）抗體檢測為陰性，弓形蟲(chóng)抗原經(jīng)超聲波完全破碎滅活，無(wú)感染性，試劑盒內其它各種組分均無(wú)生物傳染性。由于不能保證檢測原料所有的傳染性因素，因此本試劑盒應作為具有潛在的傳染性材料對待，所有接觸試劑盒的人員應按良好的實(shí)驗室規范要求進(jìn)行操作。
8.  任何臨床樣本都應作為具有傳染性樣品對待。
9.  顯色液B中含TMB，在試驗中會(huì )誘發(fā)其它反應；終止液含硫酸，有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應立即用水徹底清洗。
【標識的解釋】
包裝標簽
的標識    
標識的含義 溫度限制 體外診斷醫療器械 參考使用說(shuō)明 不得二次使用
【參考文獻】
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【基本信息】
注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
住所：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
聯(lián)系方式：電話(huà)號碼：0756-3890858
傳真號碼：0756-3890848
售后服務(wù)單位名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
聯(lián)系方式：電話(huà)號碼：0756-3890858
生產(chǎn)地址：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
生產(chǎn)許可證編號：粵食藥監械生產(chǎn)許20040941號
【醫療器械注冊證書(shū)編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】國械注準20163402549
【說(shuō)明書(shū)核準及修改日期】2016年12月29日