風(fēng)疹病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫捕獲法）說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
中文名稱(chēng)：風(fēng)疹病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫捕獲法）
【包裝規格】
48人份／盒、96人份／盒。
【預期用途】
定性檢測人血清或血漿樣本中的風(fēng)疹病毒IgM抗體。
用于風(fēng)疹病毒感染的輔助診斷。檢測不得用于無(wú)癥狀人群的產(chǎn)前篩查；不得將本試劑的檢測結果單獨作為終止妊娠的依據。
風(fēng)疹[1～3]屬于皰疹類(lèi)病毒中的披膜病毒科風(fēng)疹病毒屬，是引起風(fēng)疹的病原體，為RNA病毒。風(fēng)疹病毒（rubella virus，RV）經(jīng)過(guò)呼吸道傳播，潛伏期約2～3周，病毒增殖后進(jìn)入血流引起病毒血癥。風(fēng)疹的臨床表現類(lèi)似麻疹，較麻疹感染癥狀輕，病程短，臨床癥狀不易與麻疹區分，需要血清學(xué)方法鑒定。60年代中期，風(fēng)疹疫苗的研制成功，使先天性風(fēng)疹感染成為可預防的疾病。風(fēng)疹病毒在人群中感染極為普遍，發(fā)達國家和地區由于對學(xué)齡前兒童、青少年和育齡婦女廣泛接種疫苗，使得風(fēng)疹的發(fā)病率很低[4、5]。而在我國不少地區仍有發(fā)生和流行[4、6～8]。妊娠期間，尤其是在妊娠早期感染了風(fēng)疹病毒，不論發(fā)生顯性或隱性感染均可導致胎兒患先天性風(fēng)疹綜合征(CRS)，即多臟器受到損害而導致先天性缺損。主要臨床表現為：新生兒先天性心臟病、白內障、先天性耳聾、智力低下、發(fā)育遲緩、小頭兒等。其損害的程度與孕婦感染的時(shí)間有關(guān)，妊娠期感染越早，畸形發(fā)生率越高，損害程度也越大。
由于IgM抗體為早期感染指標，對胎兒影響巨大，所以IgM抗體的檢測備受關(guān)注，胎盤(pán)中特異性IgM抗體的檢測是診斷胎兒宮內感染的可靠依據。
【檢驗原理】
酶聯(lián)免疫捕獲法原理：用抗人IgM-μ鏈單克隆抗體包被微孔板，加待檢血清或血漿到板孔中，樣品中所含的IgM抗體與微孔板上的抗人IgM-μ鏈抗體結合，形成抗體－二抗復合物。洗板后加入風(fēng)疹病毒抗原酶標記物，形成（抗體－二抗－抗原酶標記物）免疫復合物，洗板后加入顯色液，在酶作用下產(chǎn)生顏色反應，通過(guò)酶標儀測定顯色反應的強弱即可定性檢測待檢樣品中的風(fēng)疹病毒IgM抗體。
【主要組成成分】
1. 本試劑盒中包含的組分：
序號 組分名稱(chēng) 主要成分 使用方法 每盒數量
    96人份/盒 48人份/盒
1 預包被抗人IgM-μ鏈抗體的微孔板 微孔板中預包被小鼠抗人IgM-μ鏈單克隆抗體。 直接使用，可拆成單孔使用 96孔 48孔
2 風(fēng)疹病毒抗原酶標記物 辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的風(fēng)疹病毒抗原；硼酸鹽緩沖液，含防腐劑、蛋白穩定劑。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 風(fēng)疹病毒IgM抗體陽(yáng)性對照 風(fēng)疹病毒IgM抗體陽(yáng)性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 風(fēng)疹病毒IgM抗體陰性對照 風(fēng)疹病毒IgM抗體陰性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 風(fēng)疹病毒IgM抗體臨界對照 風(fēng)疹病毒IgM抗體陽(yáng)性人血清或血漿；硼酸鹽緩沖液，含0.02%硫柳汞、蛋白穩定劑。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 顯色液A 檸檬酸、過(guò)氧化氫。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 顯色液B 檸檬酸、四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 濃縮洗滌液
（10倍） 磷酸鹽緩沖液，含0.5%吐溫-20，10倍濃縮。 用蒸餾水或去離子水10倍稀釋后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 樣品稀釋液（IgM） 硼酸鹽緩沖液，含甘油。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 終止液 0.5 mol/L 硫酸溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋   1個(gè) 1個(gè)
12 封板膜   4片 4片
13 記錄紙   1份 1份
注：酶標記物、臨界對照、陽(yáng)性對照、陰性對照，必須使用試劑盒配備的，不能使用其它批號產(chǎn)品。樣品稀釋液（IgM）可用于本公司IgM抗體檢測系列的ELISA試劑盒。顯色液A、顯色液B、終止液、濃縮洗滌液為通用試劑，可以用于本公司所有ELISA試劑盒。
2. 需要但未提供的材料：
蒸餾水或去離子水
微孔板清洗器
10μL～100μL、1mL移液器與一次性吸嘴
37℃恒溫設備
微孔振蕩器
酶標儀
60分鐘或更長(cháng)時(shí)程的計時(shí)器
【儲存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。
拆封后未用完的微孔板應放入密封袋內2℃～8℃保存。液體組分應擰緊瓶蓋2～8℃保存。各組分拆封后應在一個(gè)月內用完。
生產(chǎn)日期及失效日期見(jiàn)標簽。
【適用儀器】
具有450nm和630nm波長(cháng)的酶標儀
【樣本要求】
應按照臨床采血技術(shù)規范操作采集血清或血漿樣品。室溫保存樣品不要超過(guò)8小時(shí)；若實(shí)驗在8小時(shí)以后進(jìn)行，需將樣品保存在2℃～8℃；如保存超過(guò)1周則保存在-20℃以下，并避免反復凍融。本試驗可用于含乙二胺四乙酸（EDTA）、檸檬酸鈉、肝素鈉、草酸鈉、雙草酸鹽抗凝劑樣本的檢測，但含其它種類(lèi)抗凝劑的樣本能否用于本試驗尚無(wú)實(shí)驗數據。盡管膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯對本試劑盒檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，仍應避免使用黃疸、溶血或高血脂樣品。明顯被污染的樣品不能用于檢測。
【檢驗方法】
1. 試驗過(guò)程注意事項
1.1 試劑盒各組分從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應在室溫平衡至無(wú)潮氣方可使用。拆封后未用完的包被板應放入密封袋內保存。
1.2 在儲存及孵育過(guò)程中，應避免強光直接照射。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染。
1.3為避免試劑或樣品的微生物污染及交叉污染，應使用一次性吸嘴，不要重復使用。
1.4 在取用對照品和酶標記物之前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻，加樣前，使用微孔振蕩器充分混勻稀釋過(guò)的樣品。
1.5嚴格遵守規定的孵育時(shí)間和溫度。如果第一個(gè)孔與最后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔太長(cháng)，將會(huì )導致不同的“預孵育”時(shí)間，從而影響測量值的準確性及重復性。
1.6 洗滌結束時(shí)，應將微孔板倒扣于紙巾上并輕輕敲打，以確保所有孔內均無(wú)洗滌緩沖液，避免產(chǎn)生泡沫。如果使用自動(dòng)洗板機，應注意正確操作。
2. 試驗準備
2.1 試劑盒反應試劑準備
2.1.1 微孔條
將檢測所需數量的微孔條固定于板架上，剩余的微孔條放入密封袋中保存。
2.1.2 洗滌液
在干凈的量筒內稀釋濃縮洗滌液。50mL濃縮洗滌液加入蒸餾水或去離子水至500mL，混勻。
2.1.3 其它液體組分
直接使用，使用前應輕輕搖動(dòng)使其充分混勻。
2.2 樣品準備
樣品1:100稀釋?zhuān)喝?0μL待檢樣品，加入至含有1mL樣品稀釋液（IgM）的小試管內，充分混勻。
3. 檢測過(guò)程
3.1 每次實(shí)驗每板須設空白孔（若以雙波長(cháng)檢測不設空白孔）、陽(yáng)性對照、陰性對照各1孔，臨界對照3孔?？瞻卓撞患訕悠泛兔笜擞浳?，只加洗液、顯色液A、顯色液B和終止液；陽(yáng)性對照、陰性對照、臨界對照直接使用，100μL/孔。其余每孔加入稀釋后樣品100μL。置37℃孵育60分鐘。
3.2 甩凈孔中液體，將洗液注滿(mǎn)每孔（約300μL/孔）后，甩凈拍干，反復3次。除空白孔外每孔加酶標記物50μL，置37℃孵育60分鐘。
3.3 甩凈孔中液體，同上洗板3次，拍干后各孔加顯色液A、顯色液B各50μL，置37℃避光10～15分鐘，每孔加入終止液50μL，輕微震蕩微孔板以混合均勻。
3.4 單波長(cháng)檢測：以空白孔調零，用酶標儀讀取450nm處的A值；
雙波長(cháng)檢測：用酶標儀讀取450nm和630nm處A值，以A450nm－A630nm計算A值。
4. 質(zhì)量控制
陰性對照值介于0.0～0.15，陽(yáng)性對照值介于0.3～1.8，臨界對照平均值介于0.15～0.8，證明實(shí)驗成立；否則試驗結果無(wú)效，需重新試驗。
【陽(yáng)性判斷值】
樣品A值＜臨界對照A值平均值為陰性
樣品A值≥臨界對照A值平均值為陽(yáng)性。
【檢驗結果的解釋】
1. 結果為陽(yáng)性提示風(fēng)疹病毒急性或近期感染，對陽(yáng)性和可疑結果建議1～2周后再次采樣檢測，動(dòng)態(tài)觀(guān)察抗體水平的變化。
2. 檢測結果僅供臨床參考，臨床醫生應結合病史、癥狀及其它檢測結果做出診斷。
【檢驗方法的局限性】
1. 樣品或試劑被微生物污染以及試劑的交叉污染可能導致錯誤結果。
2. 實(shí)驗結果表明本品與交叉反應項目中所列病原體的IgM抗體陽(yáng)性血清及類(lèi)風(fēng)濕因子無(wú)交叉反應，但與其它交叉因子的交叉反應尚無(wú)實(shí)驗數據。
【產(chǎn)品性能指標】
1. 靈敏度、特異性
通過(guò)1079例臨床研究，本品與通過(guò)CE認證的同類(lèi)進(jìn)口試劑比較，靈敏度為98.3%，特異度為98.9％。
2. 精密性
    批內變異系數CV（%）不高于15%（n＝10）。
3. 交叉反應
未發(fā)現本品與類(lèi)風(fēng)濕因子及以下病原體的IgM抗體陽(yáng)性血清發(fā)生交叉反應：弓形蟲(chóng)、麻疹病毒、巨細胞病毒、單純皰疹I(lǐng)型病毒、單純皰疹I(lǐng)I型病毒。
4. 干擾試驗
4.1 與樣品接觸的抗凝劑（EDTA、檸檬酸鈉、肝素鈉、草酸鈉、雙草酸鹽）對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾。
4.2 纖維蛋白原對本品檢測結果無(wú)顯著(zhù)干擾，因此本品可以檢測人血清或血漿樣品。
【注意事項】
1. 本品僅用于體外診斷，一次性使用。
2. 用于制備本試劑盒陰性對照、陽(yáng)性對照、臨界對照的血清或血漿已經(jīng)乙肝表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒（HCV）抗體、梅毒螺旋體抗體和人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）抗體檢測為陰性，試劑盒內其它各種組分均無(wú)生物傳染性。由于不能保證檢測各組分所有的傳染性因素，因此本試劑盒應作為具有潛在的傳染性材料對待，所有接觸試劑盒的人員應按實(shí)驗室規范要求進(jìn)行操作。
3. 任何臨床樣品都應作為具有傳染性樣品對待。
4. 待檢樣品及其他潛在感染材料試驗后應予以消毒。
5. 注意避免皮膚或黏膜直接接觸試劑或樣品。顯色液中含TMB，終止液含硫酸。含TMB的試劑在試驗中會(huì )誘發(fā)其它反應；含硫酸的試劑有腐蝕性。一旦接觸到這些液體，應立即用水徹底清洗。
【標識的解釋】
包裝標簽
的標識    
標識的含義 溫度限制 體外診斷醫療器械 參考使用說(shuō)明 不得二次使用
【參考文獻】
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【基本信息】
注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
住所：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
聯(lián)系方式：電話(huà)號碼：0756-3890858
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售后服務(wù)單位名稱(chēng)：珠海經(jīng)濟特區海泰生物制藥有限公司
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生產(chǎn)地址：珠海市唐家灣鎮港灣大道創(chuàng )新四路18號     
生產(chǎn)許可證編號：粵食藥監械生產(chǎn)許20040941號
【醫療器械注冊證書(shū)編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】國械注準20163402550
【說(shuō)明書(shū)核準及修改日期】2016年12月29日